圖甲為應用基因編輯去除CFTR基因（控制CFTR蛋白的合成），獲得患囊性纖維病的編輯小鼠4的培育流程。請回答下列問題：

（1）對1號小鼠進行超數(shù)排卵處理，收集并選取處在

減數(shù)第二次分裂中期

減數(shù)第二次分裂中期

時期的卵母細胞用于核移植。
（2）采集2號小鼠的組織細胞，放置于37℃的CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO₂的作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（3）嘗試用基因療法給剛出生的編輯小鼠4號治療囊性纖維病。其中，將CFTR基因插入質(zhì)粒中，構建了基因表達載體，其部分結構和酶切位點的示意圖如乙，圖中E1～E，四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。據(jù)圖推斷，在將CFTR基因插入質(zhì)粒時，應使用

E₂、E₄

E₂、E₄

限制酶，目的是

保證 CFTR基因完整且能與載體正確連接

保證 CFTR基因完整且能與載體正確連接

。
（4）為獲得更多基因編輯小鼠，可在胚胎移植前對胚胎進行

分割

分割

，所需要的主要儀器設備包括

實體顯微鏡和顯微操作儀

實體顯微鏡和顯微操作儀

。
（5）請設計一個實驗，從分子水平檢測CFTR基因是否被導入編輯小鼠4號并正常表達。
①實驗思路：

用含CFTR基因的放射性同位素探針與提取的編輯小鼠4號 DNA 進行 DNA 分子雜交，觀測是否出現(xiàn)相應的雜交帶；利用 CFTR蛋白抗體與編輯小鼠4號提取的蛋白質(zhì)進行抗原-抗體雜交，觀測是否出現(xiàn)相應的雜交帶

用含CFTR基因的放射性同位素探針與提取的編輯小鼠4號 DNA 進行 DNA 分子雜交，觀測是否出現(xiàn)相應的雜交帶；利用 CFTR蛋白抗體與編輯小鼠4號提取的蛋白質(zhì)進行抗原-抗體雜交，觀測是否出現(xiàn)相應的雜交帶

。
②預期結果：

若觀測到相應的雜交帶，則 CFTR基因被導入編輯小鼠4號，否則沒有；若觀測到相應的雜交帶，則 CFTR基因正常表達，否則沒有

若觀測到相應的雜交帶，則 CFTR基因被導入編輯小鼠4號，否則沒有；若觀測到相應的雜交帶，則 CFTR基因正常表達，否則沒有

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