血凝素基因（HA）編碼的血凝素是構(gòu)成流感病毒囊膜纖突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2兩個亞單位，其中HA1含有病毒與受體相互作用的位點。IgGFc基因片段（長度為717bp）編碼人IgG抗體中的一段小肽，常作為融合蛋白標(biāo)簽。蛋白質(zhì)分泌依賴于信號肽的引導(dǎo)，本研究中用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽，科研人員嘗試構(gòu)建IL-2SS/HA1/IgGFc融合蛋白表達(dá)載體，并導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)和分泌，請回答：
（1）流感病毒囊膜主要由 蛋白質(zhì)和磷脂蛋白質(zhì)和磷脂組成，囊膜上血凝素的合成場所在 宿主細(xì)胞的核糖體宿主細(xì)胞的核糖體。
（2）本實驗用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽有利于 融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合，PCR擴(kuò)增目的基因時應(yīng)該選擇圖中引物 bb。
（3）設(shè)計引物時，不能包含基因HA1的終止密碼子的編碼序列，原因是 若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)。引物序列的長度及 CG含量CG含量直接影響著PCR過程中退火溫度的設(shè)定。
（4）應(yīng)選擇限制酶 EcoRVEcoRV來切割質(zhì)粒A，然后直接將PCR產(chǎn)物與質(zhì)粒A混合，同時加入 DNA連接DNA連接酶，使得目的基因與質(zhì)粒A相連。若目的基因與質(zhì)粒A正向連接，用BamHⅠ和SacⅠ同時切割重組質(zhì)粒，完全酶切后的產(chǎn)物的長度約為 717717bp。
（5）融合蛋白中的標(biāo)簽蛋白有利于目的蛋白的分離和純化，基因工程生產(chǎn)HA1作為疫苗時，選擇人IgGFc作為標(biāo)簽的優(yōu)點還有 人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程。
【答案】蛋白質(zhì)和磷脂；宿主細(xì)胞的核糖體；融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合；b；若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)；CG含量；EcoRV；DNA連接；717；人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：53引用：6難度：0.9
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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