為了研究視神經病變誘導基因（OPTN）的分子機制，科研人員用OPTN基因的部分DNA片段構建表達載體，導入細胞后轉錄出的RNA會抑制細胞中OPTN蛋白的合成。實驗中使用的DNA片段和載體上限制酶的識別序列如下：
| 限制酶 | BglⅡ | BamHⅠ | HindⅢ | XhoⅠ |
| 識別序列和切割位點 | A↓GATCT TCTAG↑A |
G↓GATCC CCTAG↑G |
A↓AGCTT TTCGA↑A |
G↓TCGAG GAGCT↑C |
（1）應選用BamHⅠ和HindⅢ切割載體質粒，理由是
目的基因片段和質粒上均含有HindⅢ的酶切位點；BamHⅠ與BglⅠ處理產生的黏性末端相同；BamHⅠ和HindⅢ處理質粒后能保證目的基因插入質粒的啟動子和終止子之間
目的基因片段和質粒上均含有HindⅢ的酶切位點；BamHⅠ與BglⅠ處理產生的黏性末端相同；BamHⅠ和HindⅢ處理質粒后能保證目的基因插入質粒的啟動子和終止子之間
。（2）重組質粒上
無
無
（填“有”或“無”）BamHⅠ的識別序列，因此可通過酶切法鑒定質粒是否重組成功，方法如下：用BamHⅠ和XhoⅠ兩種限制酶處理質粒，未重組的質粒將產生2
2
種片段，重組的質粒將產生1
1
種片段。（3）重組質粒導入細胞后，能抑制細胞中OPTN蛋白合成的原因是
重組質粒中OPTN基因部分片段轉錄產生的mRNA與細胞中指導OPTN蛋白合成的mRNA互補結合，阻礙了翻譯過程的進行
重組質粒中OPTN基因部分片段轉錄產生的mRNA與細胞中指導OPTN蛋白合成的mRNA互補結合，阻礙了翻譯過程的進行
。（4）要證明導入重組質粒的細胞中OPTN基因的表達受到抑制，需要設置
導入未重組質粒（和未導入質粒）的細胞
導入未重組質粒（和未導入質粒）的細胞
作為對照組。通常采用抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
法檢測細胞中OPTN蛋白的表達水平。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因片段和質粒上均含有HindⅢ的酶切位點；BamHⅠ與BglⅠ處理產生的黏性末端相同；BamHⅠ和HindⅢ處理質粒后能保證目的基因插入質粒的啟動子和終止子之間；無；2；1；重組質粒中OPTN基因部分片段轉錄產生的mRNA與細胞中指導OPTN蛋白合成的mRNA互補結合，阻礙了翻譯過程的進行；導入未重組質粒（和未導入質粒）的細胞；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：10引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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