徑柳匙葉草是一種泌鹽植物?？蒲泄ぷ髡邔搅兹~草的TaNHX2基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，圖中箭頭所指為Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制酶的切點；圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖3是農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，請分析回答問題：
（1）基因工程的核心步驟是 基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建。
（2）將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從 基因文庫基因文庫獲取目的基因。此外也可利用PCR技術(shù)擴增TaNHX2基因，需要加入的酶是 Taq酶Taq酶，反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設(shè)定，55～60℃有利于 引物引物結(jié)合到互補DNA鏈上。
（3）若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ切割圖3所示質(zhì)粒，該方案的缺陷是 目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）（答出一點即可）。
（4）目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄出了mRNA，常用 分子雜交分子雜交的方法進行檢測，為了檢測技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于 個體個體水平的檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體的構(gòu)建；基因文庫；Taq酶；引物；Sau3AⅠ；目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）；分子雜交；個體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/9 8:0:9組卷：1引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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