R-7是家蠶體內的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列（3′-MTR）結合，進而影響基因的表達。為研究R-7是否影響家蠶基因B（調控家蠶眼睛發(fā)育）的表達，科研人員將基因B中對應3′-MTR的DNA片段與熒光素酶基因重組（R-7不影響熒光素酶基因的表達，在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應并發(fā)出熒光），如圖1所示。將該重組載體導入家蠶胚胎細胞并檢測其表達情況，結果如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）基因工程的第一個步驟是

獲取目的基因

獲取目的基因

。通過3′-MTR獲取3′-MTR的DNA片段的可行性方法是

以3'-MTR為模板，逆轉錄人工合成3'-MTR的DNA片段

以3'-MTR為模板，逆轉錄人工合成3'-MTR的DNA片段

。要想短時間內獲得大量目的基因，需要用到的技術是

PCR擴增技術

PCR擴增技術

。
（2）圖1中所示的基因表達載體中含有啟動子、終止子和

標記基因（或熒光素酶基因）

標記基因（或熒光素酶基因）

。目的基因（3′-MTR的DNA）片段應插入位點

2

2

。
（3）科研人員從圖2所示的實驗組和對照組細胞中提取蛋白質，經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值。實驗組為將重組載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中，對照組1為將重組載體導入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細胞中，則對照組2應為

將不含對應3′-MTR的DNA片段（含有熒光素酶基因）的表達載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中

將不含對應3′-MTR的DNA片段（含有熒光素酶基因）的表達載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中

。由結果推知，R-7通過

與基因B所轉錄的mRNA尾端的3’-MTR結合

與基因B所轉錄的mRNA尾端的3’-MTR結合

進而抑制基因B的表達。