RBD是新型冠狀病毒表面囊膜S蛋白的受體結合域肽段。Fc為人源抗體IgGⅠ的部分重鏈，能通過二硫鍵相結合形成Fc二聚體。科研人員為研制重組蛋白疫苗，構建了融合表達RBD和Fc的重組質粒。實驗流程圖如圖，請回答下列問題。
（1）通過重疊延伸PCR（重疊鏈相互搭橋、互為模板而延伸，最終將不同來源的DNA片段拼接起來）獲取融合基因。
①第一次PCR中，至少經 22次擴增，可得到末端平齊且含引物2的產物；擴增n次后，末端平齊且含引物2的DNA分子數(shù)量為 2n-n-12n-n-1個；
②第二次PCR擴增表達Fc的DNA片段；
③經第三次PCR獲取融合基因，第三次PCR比第一次PCR延伸所需時間 長長（選填“長”或“短”），原因是 第三次PCR中待擴增的片段長第三次PCR中待擴增的片段長。
（2）構建基因表達載體
| 分步實驗目的 | 簡易操作 |
| 酶切融合基因和質粒pCDNA3.1 | 37℃條件下，酶切8小時，電泳鑒定、回收；酶切位點應添加在引物① 1和4 1和4 的末端。（填引物種類） |
| 獲取重組質粒 | 將上述融合基因、質粒和② DNA連接 DNA連接 酶一起加入反應體系，16℃反應過夜。 |
| 利用大腸桿菌③ 擴增重組質粒 擴增重組質粒 |
將產物加入感受態(tài)大腸桿菌培養(yǎng)液，培養(yǎng)過夜，提取更多重組質粒。 |
使重組DNA進入受體細胞
使重組DNA進入受體細胞
。（4）已知RBD二聚體疫苗比RBD單體疫苗效果更優(yōu)，推斷重組蛋白中Fc的作用是
有效介導RBD二聚體的形成
有效介導RBD二聚體的形成
。【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】2；2n-n-1；長；第三次PCR中待擴增的片段長；1和4；DNA連接；擴增重組質粒；使重組DNA進入受體細胞；有效介導RBD二聚體的形成
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：33引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6