蜘蛛絲是自然界中機(jī)械性能最好的天然蛋白纖維，其強(qiáng)度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應(yīng)用前景。但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直難以解決。2018年8月，中科院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心利用基因工程技術(shù)成功的在家蠶絲腺和蠶繭中大量表達(dá)蜘蛛絲蛋白?；卮鹣铝袉栴}：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要在目的基因前后兩端分別引入

XbaⅠ和SacⅠ

XbaⅠ和SacⅠ

的酶切位點(diǎn)，該方法比用同一種酶進(jìn)行酶切的優(yōu)勢是

防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因反向連接等

防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因反向連接等

（答出兩點(diǎn)）。
（2）為能從蠶絲中提取蛛絲蛋白，基因表達(dá)載體中目的基因的首段必須含有使其僅能在蠶的絲腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的

啟動子

啟動子

。當(dāng)其與

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別和結(jié)合后才能驅(qū)動基因成功表達(dá)。
（3）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50%，此成果所用到的工程技術(shù)為

蛋白質(zhì)工程

蛋白質(zhì)工程

。
（4）在研究過程中，發(fā)現(xiàn)目的基因已經(jīng)插入到蠶絲腺細(xì)胞染色體的DNA上，蠶絲中卻未能提取到蜘蛛絲，請分析可能出現(xiàn)的原因并說出其相應(yīng)的檢測方法：

目的基因沒有進(jìn)行正確的轉(zhuǎn)錄，可用DNA探針進(jìn)行分子雜交的方法進(jìn)行檢測；目的基因轉(zhuǎn)錄出的RNA沒有進(jìn)行翻譯，可用抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測

目的基因沒有進(jìn)行正確的轉(zhuǎn)錄，可用DNA探針進(jìn)行分子雜交的方法進(jìn)行檢測；目的基因轉(zhuǎn)錄出的RNA沒有進(jìn)行翻譯，可用抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測

（答兩點(diǎn)）。