基因X的表達(dá)產(chǎn)物可保護(hù)損傷的神經(jīng)細(xì)胞??茖W(xué)家構(gòu)建了含X的基因表達(dá)載體(圖1),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中,用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)據(jù)此回答下列問(wèn)題:
(1)構(gòu)建含X的基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選擇圖1中的BamHⅠBamHⅠ限制酶。
(2)酶切后的載體和基因X進(jìn)行連接,可產(chǎn)生3種連接產(chǎn)物:?jiǎn)蝹€(gè)載體自連,基因X與載體正向連接、基因X與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種產(chǎn)物,選擇EcoRI酶和HindHⅢ酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切,并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析,結(jié)果如圖2所示。圖中1、2、3泳道分別對(duì)應(yīng)的載體的連接方式是載體自連載體自連、反向連接反向連接、正向連接正向連接。
(3)在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過(guò)程中,可使用胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶將細(xì)胞分散開(kāi)。分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁。
(4)將正向連接的重組載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后,為了檢測(cè)基因X是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,可用分子雜交分子雜交技術(shù)。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí),需進(jìn)行傳代傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】BamHⅠ;載體自連;反向連接;正向連接;胰蛋白酶或膠原蛋白;細(xì)胞貼壁;分子雜交;傳代
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.7
相似題
-
1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
把好題分享給你的好友吧~~