現(xiàn)有重組質(zhì)粒甲（共含2686個(gè)堿基對(duì)，不含T-DNA）和乙，為避免基因反接，研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質(zhì)粒甲、乙，再利用所得片段構(gòu)建了重組質(zhì)粒丙（如圖所示），然后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞。培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請(qǐng)回答：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是將VP1基因插入到

T-DNA

T-DNA

中，從而使VP1基因進(jìn)入植物細(xì)胞后，能整合到染色體的DNA上。利用重組質(zhì)粒甲、乙構(gòu)建丙的過(guò)程中，用到的工具酶是

限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶

限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶

。
（2）將重組質(zhì)粒甲、乙和丙進(jìn)行分組，每組只含其中一種重組質(zhì)粒，同時(shí)用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割，結(jié)果如表所示：

組別	切割后所得DNA片段的情況
第1組	只得到含有2146和540個(gè)堿基對(duì)的2種DNA片段
第2組	只得到含有540和12400個(gè)堿基對(duì)的2種DNA片段
第3組	只得到含有12400和1000個(gè)堿基對(duì)的2種DNA片段

切割前，重組質(zhì)粒甲含有

0

0

個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，限制酶Ⅰ在重組質(zhì)粒甲中有

1

1

個(gè)切割位點(diǎn)，表中第

2

2

組是切割重組質(zhì)粒丙的結(jié)果。
（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要無(wú)菌操作，因此對(duì)外植體（離體的組織塊）要進(jìn)行

消毒

消毒

處理。用于培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基不適用于培養(yǎng)胚狀體，原因是

培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同

培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同

。