2019年底，新冠肺炎在我國(guó)大面積流行。病原體為一種新型RNA冠狀病毒，即2019-nCoV。科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原，擬利用基因工程研制新冠病毒重組蛋白疫苗用于接種預(yù)防。圖1表示病毒S蛋白的基因，圖2表示取自真菌細(xì)胞的質(zhì)粒PcMV及其上部分限制酶切位點(diǎn)，圖3表示疫苗制作的簡(jiǎn)要操作流程。
（1）圖3中步驟①所需要的酶和原料是 逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸。步驟②需要的酶是限制酶和 DNA連接酶DNA連接酶。
（2）圖1中不能選擇EcoRI和AccI兩種限制酶切割S蛋白基因，原因是 這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性?，F(xiàn)在科研人員已經(jīng)可以根據(jù)需要在目的基因兩端添加需要的限制酶切割位點(diǎn)序列，但是一般不在目的基因的兩端添加同一種酶切位點(diǎn)，原因是 防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上。若選擇兩種酶且位點(diǎn)序列添加在S蛋白基因的左右兩端（考慮轉(zhuǎn)錄的方向）應(yīng)分別選擇 ApaⅠ和SolⅠApaⅠ和SolⅠ。
（3）PcMV質(zhì)粒上氨芐青霉素抗性基因的作用是 篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。
（4）將表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)的原因是 PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)。為了檢驗(yàn)表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸；DNA連接酶；這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性；防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上；ApaⅠ和SolⅠ；篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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