如圖1表示某質(zhì)粒,該質(zhì)粒含有抗氨芐青霉素抗性基因(amp')和LacZ基因,LacZ基因能合成β-半乳糖苷酶,該酶能將白色底物X-Gal轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,圖2表示含目的基因的DNA片段,實(shí)驗(yàn)小組利用該質(zhì)粒為載體將目的基因?qū)氪竽c桿菌,并篩選成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞(ScaⅠ、ApaⅠ、EcoRⅠ表示限制酶切割位點(diǎn)).請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
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(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定的復(fù)制并表達(dá)使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定的復(fù)制并表達(dá).在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用的限制酶是ApaⅠ和EcoRⅠApaⅠ和EcoRⅠ.
(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),應(yīng)用CaCl2CaCl2處理大腸桿菌,制備感受態(tài)細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)室選用微生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是繁殖速度快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少繁殖速度快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少.
(3)重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后,應(yīng)將大腸桿菌置于以X-Gal為底物,并添加氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),挑選出白色白色(填“白色”或“藍(lán)色”)菌落進(jìn)行選擇培養(yǎng).
(4)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞常用的方法是DNA分子雜交技術(shù)DNA分子雜交技術(shù),該方法依據(jù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì).
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定的復(fù)制并表達(dá);ApaⅠ和EcoRⅠ;CaCl2;繁殖速度快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少;氨芐青霉素;白色;DNA分子雜交技術(shù);堿基互補(bǔ)配對(duì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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