大芻草是玉米是原始祖先，具有較強的抗病抗逆特性，為玉米育種提供了原始的遺傳材料。研究發(fā)現(xiàn)大芻草基因組中有一個D基因僅在體細胞（2n）和精子中正常表達，在卵細胞中不轉錄。為研究D基因表達對卵細胞的影響，設計了如圖1實驗。據(jù)圖回答：
（1）D基因在大芻草卵細胞中不轉錄，從基因結構角度推測其可能的原因是卵細胞中 D基因的啟動子無法啟動轉錄D基因的啟動子無法啟動轉錄。
（2）要構建大芻草的CDNA文庫，應從大芻草 體細胞或精子體細胞或精子中提取總RNA，原因是 D基因僅在大芻草的體細胞和精子中正常表達D基因僅在大芻草的體細胞和精子中正常表達。由總RNA在相關酶的作用下獲得D基因編碼蛋白的序列。按如圖所示構建重組表達載體。
（3）在過程①、②轉化篩選時，過程 ②②中T-DNA整合到受體細胞染色體DNA上。
（4）從轉基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細胞內僅含一個染色體組，判定該胚是由未受精的卵細胞發(fā)育形成的，而一般情況下大芻草卵細胞在未受精時不進行發(fā)育，由此表明 D基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚D基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。
（5）在大芻草基因組中發(fā)現(xiàn)另一個B基因與其育性相關，為進一步研究B基因的功能，研究者將一段T-DNA插入到B基因中，致使該基因失活，失活后的基因記為b,現(xiàn)以野生植株和突變植株作為親本進行雜交實驗，統(tǒng)計母本植株的結實率，結果如表所示：
| 雜交編號 | 親本組合 | 結實率 |
| a | ♀BB×♂bb | 0.1 |
| b | ♀bb×♂BB | 0.5 |
| c | ♀BB×♂BB | 0.5 |
雄
雄
配子育性降低。②讓雜交a的F1給雜交b的F1授粉，得到F2。為驗證F2植株的基因型，研究者據(jù)B基因、T-DNA的序列設計了3種引物，如圖2所示。隨機選取F2植株若干，提取各植株的總DNA，分別用“引物Ⅰ+Ⅲ”組合及“Ⅱ+Ⅲ”組合進行PCR，檢測是否能擴增（完整的T-DNA過大，不能完成PCR擴增），如果引物“Ⅰ+Ⅲ”組及“Ⅱ+Ⅲ”組進行PCR均可完成擴增，則相應植株的基因型為
Bb
Bb
。如果 僅引物“Ⅱ+Ⅲ”組進行PCR能完成擴增，而“Ⅰ+Ⅲ”組不能完成擴增
僅引物“Ⅱ+Ⅲ”組進行PCR能完成擴增，而“Ⅰ+Ⅲ”組不能完成擴增
，則相應植株的基因型為BB。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】D基因的啟動子無法啟動轉錄；體細胞或精子；D基因僅在大芻草的體細胞和精子中正常表達；②；D基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚；雄；Bb；僅引物“Ⅱ+Ⅲ”組進行PCR能完成擴增，而“Ⅰ+Ⅲ”組不能完成擴增
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：47引用：2難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6