新冠病毒（nCoV-2019）是冠狀病毒大家庭中的新的一員，其堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性，與流感病毒堿基相似度也較高，但nCoV-2019有部分特有序列?！皩崟r熒光定量RT-PCR”是新冠疫情防控的一把利刃，通常在1～2h內即可得到檢測結果。TaqMan探針是實時熒光定量RT-PCR技術中一種常用探針（如圖1），其5'末端連接熒光基團（R），3'末端連接淬滅劑（Q）。當探針完整時，R發(fā)出的熒光信號被Q吸收而不發(fā)熒光。在PCR擴增過程中，當Taq酶遇到探針時會使探針水解而釋放出游離的R和Q，R發(fā)出的熒光信號被相應儀器檢測到，熒光信號的累積與PCR產物數量完全同步（如圖2）?；卮鹣铝袉栴}：

（1）PCR技術

可以

可以

（填“可以”或“不可以“）用來獲取目的基因；PCR技術中Taq酶的適合溫度范圍是

50～90℃

50～90℃

。
（2）這種分子層面的熒光RT-PCR檢測具有特異性和靈敏性都很高的特點，主要與試劑盒中的

引物

引物

、

TaqMan探針

TaqMan探針

有關。
（3）在實時熒光定量RT-PCR過程中，通過熒光強度的變化監(jiān)測產生量的變化從而得到一條熒光擴增曲線圖（如圖3）。最初數個循環(huán)里，熒光信號變化不大，設置為基線；之后進入指數增長期，在這個時期設置一個熒光閾值線；Ct值是PCR擴增過程中，擴增產物的熒光信號達到設定的閾值時所經過的擴增循環(huán)次數，則Ct值越小，起始模板量越

多

多

，從而實現對起始模板的相對定量分析。若每分子探針水解釋放的R基團熒光強度為定值a,則反應體系中某時刻熒光信號強度（Rn）主要與

試劑盒中原料

試劑盒中原料

、

引物和探針數量（Taq酶活性）

引物和探針數量（Taq酶活性）

有關。
（4）新冠病毒核酸檢測也存在一定的弊端，如交叉感染和假陽性等，請根據所學知識及題中資料分析防止出現假陽性的做法：

新冠病毒堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性，與流感病毒堿基相似度也較高

新冠病毒堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性，與流感病毒堿基相似度也較高

。（答出2點）