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鹽脅迫會影響植物的生長,可用轉基因技術提高植物的耐鹽能力。mybx是響應鹽脅迫的關鍵轉錄因子,其功能缺失突變體對150mmol?L-1的NaCl高度敏感。HKT1基因表達的Na+轉運蛋白介導Na+從木質部導管到木質部薄壁細胞的運輸,減少木質部的Na+含量,從而提高植物的耐鹽能力。科研人員構建HKT1基因的表達載體獲得HKT1基因表達菌體,構建過程如圖所示。四種限制酶的識別序列及切割位點如表所示?;卮鹣铝袉栴}:

限制酶 HindⅢ BamHⅠ XhoⅠ BglⅡ
識別序列及切割位點 A↓AGCTT G↓GATCC C↓TCGAG A↓GATCT
(1)將擬南芥細胞破碎提取RNA時,需要在溶液中加入
RNA酶抑制劑
RNA酶抑制劑
,以防止RNA降解。過程③要選擇合適的限制酶切割含HKT1基因的DNA片段,應選用的表中的限制酶是
HindⅢ、XhoI
HindⅢ、XhoI
。
(2)過程⑤將重組質粒導入大腸桿菌。在篩選含有HKT1基因的大腸桿菌時,除必要的營養(yǎng)物質,還需要在培養(yǎng)基中添加
卡那霉素
卡那霉素
。提取重組質粒A將其導入農桿菌,用農桿菌侵染擬南芥mybz突變體花序,農桿菌的作用是
攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達
攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達

(3)檢測轉HKT1基因擬南芥mybr突變株是否表達出Na+轉運蛋白時,可用
抗原―抗體雜交
抗原―抗體雜交
技術進行檢測。若Na+轉運蛋白高度表達,還需要進一步鑒定其抗性程度,實驗的思路是
將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
。

【答案】RNA酶抑制劑;HindⅢ、XhoI;卡那霉素;攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達;抗原―抗體雜交;將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:43引用:6難度:0.6
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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