人乳頭瘤病毒(簡(jiǎn)稱HPV,遺傳物質(zhì)為DNA)感染是引發(fā)宮頸癌的最主要因素。我國(guó)研制的HPV疫苗和抗L1蛋白單克隆抗體對(duì)宮頸癌的預(yù)防有良好的效果,已知L1蛋白是HPV表面的一種主要蛋白質(zhì)。根據(jù)所學(xué)知識(shí),回答下列問題。
(1)用基因工程制備HPV疫苗,首先可以通過PCR擴(kuò)增目的基因。PCR利用了 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制的原理,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成 引物引物。
(2)基因工程操作的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建,此步驟需要在適宜的溫度下進(jìn)行,主要原因是 此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度。
(3)在制備抗L1蛋白單克隆抗體時(shí),需要將小鼠B淋巴細(xì)胞與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,再用特定的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。在該培養(yǎng)基上,未融合的細(xì)胞和 融合的具有同種核的細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞能正常生長(zhǎng)。上述獲得的雜交瘤細(xì)胞不能直接用來制備抗L1蛋白單克隆抗體,需要再次對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選,原因是 B淋巴細(xì)胞有多種,因此獲得的雜交瘤細(xì)胞也有多種,需要再次篩選B淋巴細(xì)胞有多種,因此獲得的雜交瘤細(xì)胞也有多種,需要再次篩選。
(4)抗L1蛋白單克隆抗體主要的優(yōu)點(diǎn)是 特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備,可以特異性地和結(jié)合,精準(zhǔn)診斷測(cè)試者是否感染HPV。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】DNA雙鏈復(fù)制;引物;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度;融合的具有同種核的細(xì)胞;B淋巴細(xì)胞有多種,因此獲得的雜交瘤細(xì)胞也有多種,需要再次篩選;特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:2難度:0.7
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