凝血因子VIII，又名抗血友病球蛋白A，傳統(tǒng)方法只能從人血漿中制備?，F(xiàn)欲用基因工程等生物工程技術(shù)，獲得轉(zhuǎn)基因山羊，從其乳汁中分離獲得凝血因子VIII。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括，目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因標(biāo)記基因等。其中啟動(dòng)子的作用是作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。
（2）擴(kuò)增凝血因子VIII基因，可使用PCR技術(shù)，使用此技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR技術(shù)所利用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶。
（3）目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多也是最為有效的方法是顯微注射法顯微注射法技術(shù)。為檢測(cè)凝血因子VIII基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)，用抗凝血因子VIII的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
（4）用限制酶A和限制酶B切割質(zhì)粒和凝血因子VIII基因，在DNA連接酶的作用下可構(gòu)建重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】標(biāo)記基因；作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；熱穩(wěn)定DNA聚合酶；顯微注射法；蛋白質(zhì)；重組質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：1引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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