2017年CAR-T療法獲批可用于癌癥治療。其核心是將具有腫瘤識別功能的CAR基因整合到人體T淋巴細胞,形成能準確定位并殺死癌細胞的CAR-T細胞,請回答下列問題:
(1)已知CAR基因的全部序列,科研人員通過 人工合成人工合成法和PCR技術可獲得大量該基因片段。在PCR反應體系中除模板外還需加入 引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸。
(2)治療基本過程是:分離患者T細胞并構建CAR-慢病毒運載體→體外基因轉移形成CAR-T細胞→篩選、培養(yǎng)CAR-T細胞→輸入患者體內,該療法屬于 體外基因體外基因治療,該運載體進入人體細胞的方式通常是 胞吞胞吞。該方法采用的是自身T細胞,而不用異體T細胞,其原因是 避免發(fā)生排斥反應避免發(fā)生排斥反應。
(3)為檢查CAR基因能否在T細胞中翻譯成蛋白質,可采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法檢測,CAR-T細胞培養(yǎng)所需CO2的主要作用是 維持pH的穩(wěn)定維持pH的穩(wěn)定,傳代培養(yǎng)時,貼滿瓶壁的細胞需要用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理后再進行分瓶培養(yǎng)。
【答案】人工合成;引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸;體外基因;胞吞;避免發(fā)生排斥反應;抗原-抗體雜交;維持pH的穩(wěn)定;胰蛋白酶或膠原蛋白酶
【解答】
【點評】
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