大腸桿菌是水體中常見的微生物，經(jīng)改造的大腸桿菌可用來檢測制藥廠排出的污水中某化合物X（一種遺傳毒性雜質，可損傷細胞DNA，具有致癌可能）的含量。
（1）大腸桿菌在含有伊紅—亞甲藍的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中生長，菌落呈深紫色并有金屬光澤，據(jù)此可用于檢測污染水體中大腸桿菌的數(shù)量。上述培養(yǎng)基是否屬于選擇培養(yǎng)基 不屬于不屬于，說明理由 在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖，不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖，不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長。
（2）圖1中甲、乙、丙、丁是從微生物中分離到的可被化合物X激活的4種毒性響應基因啟動子（箭頭表示轉錄方向）；圖2質粒中SPP基因的表達產(chǎn)物可使大腸桿菌等細菌裂解。將4種啟動子分別插入質粒的P區(qū)，以構建表達載體，導入大腸桿菌可獲得對化合物X敏感的工程菌。
①經(jīng)PCR反應體系擴增啟動子片段時，DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的 3'端3'端（選填“5'端”或“3'端”）開始延伸DNA鏈。除引物外，PCR反應體系中還包含緩沖液、模板DNA、dNTPdNTP和 耐高溫DNA聚合酶耐高溫DNA聚合酶等成分。
②為使4種啟動子正確插入到質粒上，利用PCR技術擴增啟動子時，需分別在4種啟動子A端和B端添加限制酶 XhoIXhoI和 SapISapI的酶切位點。
③為初步檢測表達載體是否構建成功，可用上述兩種限制酶對質粒和4種表達載體進行切割，然后對酶切產(chǎn)物進行凝膠電泳，檢測結果如圖3所示。由此可初步判定表達載體的構建 成功成功。（填“成功”或“不成功”）
④作為受體細胞的大腸桿菌能在 含化合物X含化合物X的培養(yǎng)液中生長。
（3）將獲得的工程菌甲、乙、丙、丁和對照菌分別培養(yǎng)在細菌培養(yǎng)液中，2小時后在培養(yǎng)液中加入化合物X繼續(xù)培養(yǎng)，檢測細菌的密度，結果如圖4所示。
①實驗中的對照菌是 導入空質粒的大腸桿菌導入空質粒的大腸桿菌。
②實驗中對細菌密度的統(tǒng)計方法應為 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。
③據(jù)圖4可知，4種工程菌均啟動了對化合物X的響應，判斷的依據(jù)是 在加入化合物X前，4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異，加入化合物X后，4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌在加入化合物X前，4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異，加入化合物X后，4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】不屬于；在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖，不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長；3'端；dNTP；耐高溫DNA聚合酶；XhoI；SapI；成功；含化合物X；導入空質粒的大腸桿菌；稀釋涂布平板法；在加入化合物X前，4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異，加入化合物X后，4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/7 8:0:9組卷：3引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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