家禽飼料中富含纖維素，但家禽消化道中缺少降解纖維素的酶，阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員從枯草芽孢桿菌中分離出編碼纖維素酶的W基因，并借助圖1所示的質(zhì)粒載體導入到乳酸桿菌體內(nèi)，以提高添加乳酸桿菌飼料的利用率，節(jié)省成本。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段?；卮鹣铝袉栴}：
（1）啟動子是一段有特殊序列結構的DNA片段，是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位。多數(shù)啟動子具有物種特異性，為滿足應用需要，在圖1質(zhì)粒中插入W基因的上游應選擇 乳酸桿菌乳酸桿菌（填“枯草芽孢桿菌”或“乳酸桿菌”）的啟動子。
（2）分析上述兩圖可知，應使用限制酶 EcoRⅠ和HindⅢEcoRⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒和含W基因的DNA片段，以獲得W基因能正確連接的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒導入到乳酸桿菌后，使用含抗生素 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選，以得到成功導入W基因的乳酸桿菌。
（3）將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為甲、乙、丙三組，其中甲組接種乳酸桿菌，乙組接種導入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌，丙組接種導入普通質(zhì)粒的乳酸桿菌。相同條件下培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)甲、丙兩組培養(yǎng)基中纖維素的含量無變化，而乙組含量下降，試從分子水平簡要闡述出現(xiàn)上述結果的原因：W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶。
（4）有人認為，增加導入W基因的數(shù)量會提高轉基因乳酸桿菌降解纖維素的能力。請設計一個實驗方案加以判定。（簡要寫出實驗思路） 將不同拷貝數(shù)的W基因分別導入乳酸桿菌體內(nèi)，比較各轉基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異將不同拷貝數(shù)的W基因分別導入乳酸桿菌體內(nèi)，比較各轉基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異。
【答案】RNA聚合酶；乳酸桿菌；EcoRⅠ和HindⅢ；氨芐青霉素；W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶；將不同拷貝數(shù)的W基因分別導入乳酸桿菌體內(nèi)，比較各轉基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：1難度：0.6
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規(guī)律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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