生物工程。研究人員發(fā)現(xiàn),有一種稱(chēng)作XRCC2的啟動(dòng)子(負(fù)責(zé)RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列)在正常細(xì)胞中表達(dá)水平很低,而在癌細(xì)胞卻高表達(dá)。利用該特性,研究人員結(jié)合DTA(白喉毒素A基因,其表達(dá)產(chǎn)物能夠殺死細(xì)胞)做了如圖1實(shí)驗(yàn)。
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(1)獲取XRCC2啟動(dòng)子的方法是 化學(xué)方法人工合成化學(xué)方法人工合成,該方法的意義是 獲得大量目的基因獲得大量目的基因。
(2)為了成功構(gòu)建能夠特異性殺死腫瘤細(xì)胞的質(zhì)粒,需要先將XRCC2啟動(dòng)子與DTA形成融合基因。首先用限制酶 NheI、AgeINheI、AgeI切割XRCC2啟動(dòng)子,用限制酶 AgeI、XbaIAgeI、XbaI切割DTA基因,然后用DNA連接酶將它們連接形成融合基因。為了提高融合基因與質(zhì)粒的重組效率,應(yīng)采取的措施為 提高融合基因的量提高融合基因的量。
(3)此實(shí)驗(yàn)中涉及的生物技術(shù)有 CDCD(多選)。
A.細(xì)胞融合 B.細(xì)胞核移植 C.轉(zhuǎn)基因技術(shù) D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
(4)你認(rèn)為步驟5中需要的條件有 BCDEFBCDEF(多選)。
A.CO2充足 B.適宜的O2濃度 C.pH適中 D.無(wú)菌操作 E.豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) F.35-37度溫度
(5)實(shí)驗(yàn)者分別通過(guò)電轉(zhuǎn)染法將0、0.05ug、0.1ug的重組質(zhì)粒導(dǎo)入不同腫瘤細(xì)胞中,結(jié)果如圖2,請(qǐng)分析該實(shí)驗(yàn)結(jié)果能否說(shuō)明質(zhì)粒XRCC2-DTA能夠特異性的殺死腫瘤細(xì)胞,若不能,實(shí)驗(yàn)應(yīng)做哪些改進(jìn)措施?不能,應(yīng)增添正常細(xì)胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細(xì)胞對(duì)比觀察細(xì)胞增殖情況不能,應(yīng)增添正常細(xì)胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細(xì)胞對(duì)比觀察細(xì)胞增殖情況。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】化學(xué)方法人工合成;獲得大量目的基因;NheI、AgeI;AgeI、XbaI;提高融合基因的量;CD;BCDEF;不能,應(yīng)增添正常細(xì)胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細(xì)胞對(duì)比觀察細(xì)胞增殖情況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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