基因定點整合可替換特定基因，該技術可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由某基因（A）突變引起的，將正常 A基因定點整合到 A基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體 DNA 上，替換突變基因，可用來研究該病的基因治療過程?；蚨c整合的過程如圖所示，已知 neor 基因可作為標記基因，含有 neor 的細胞具有對 G418的抗性。回答下列問題：
（1）構建重組載體，常用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。構建重組載體時，需要大量 A基因，常用 PCR擴增PCR擴增技術合成 A基因，利用該方法合成 A基因時需要設計并合成 22種引物。
（2）將重組載體導入患病小鼠胚胎干細胞的常用方法為 顯微注射技術顯微注射技術。檢測患病小鼠胚胎干細胞中是否導入重組載體的方法是在含有 G418G418的培養(yǎng)液中培養(yǎng)胚胎干細胞。
（3）用圖中重組載體轉化胚胎干細胞時，會出現(xiàn) A基因錯誤整合。錯誤整合時，重組載體上的兩個HSV-tk 至少會有一個與neor 一起整合到染色體 DNA 上。已知 HSV-tk1、HSV-tk2 的產物都把DHPG 轉化成有毒物質而使細胞死亡。將導入重組載體胚胎干細胞置于同時含有 G418 和 DHPG 的培養(yǎng)，存活下來的是 正確整合正確整合（填“正確整合”或“錯誤整合”）的胚胎干細胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接酶；PCR擴增；2；顯微注射技術；G418；正確整合
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：0引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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