類產堿假單胞菌殺蟲蛋白不易被蝗蟲體內蛋白酶降解,是一種安全的細菌殺蟲蛋白。某研究小組將類產堿假單胞菌殺蟲蛋白基因(ppip)導入牧草中獲得了抗蝗蟲牧草品種。
(1)ppip基因,還有一些抗病基因,抗除草劑基因等都是用來提高植物的抗逆抗逆能力。該研究小組檢查基因工程是否做成功的一步是目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定,其中目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是檢測轉基因生物DNA上是否插入了目的基因檢測轉基因生物DNA上是否插入了目的基因。
(2)如圖1是該研究小組設計的T-DNA元件示意圖。
①攜帶ppip的T-DNA導入植物細胞的方法是農桿菌轉化法農桿菌轉化法;T-DNA發(fā)揮的功能是將攜帶的ppip轉移至受體細胞,并整合到受體細胞染色體的DNA上將攜帶的ppip轉移至受體細胞,并整合到受體細胞染色體的DNA上。
②將被檢材料用含有底物(X-Gluc)的緩沖液浸泡,若組織細胞表達出GUS,該酶就可將X-Gluc水解生成藍色產物,從而使被檢材料顯藍色,如圖2所示。
研究發(fā)現天然植物體內無GUS,根據T-DNA元件示意圖,請思考gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因)在植物基因表達載體中作為標記基因標記基因;選取該基因的原理是天然植物體內無GUS,不能催化X-Gluc產生藍色產物;若目的基因成功導入受體細胞,與其相連的標記基因表達的GUS可催化X-Gluc產生藍色產物。因此可以通過有無藍色產物來鑒定目的基因是否導入受體細胞。天然植物體內無GUS,不能催化X-Gluc產生藍色產物;若目的基因成功導入受體細胞,與其相連的標記基因表達的GUS可催化X-Gluc產生藍色產物。因此可以通過有無藍色產物來鑒定目的基因是否導入受體細胞。。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】抗逆;目的基因的檢測與鑒定;檢測轉基因生物DNA上是否插入了目的基因;農桿菌轉化法;將攜帶的ppip轉移至受體細胞,并整合到受體細胞染色體的DNA上;標記基因;天然植物體內無GUS,不能催化X-Gluc產生藍色產物;若目的基因成功導入受體細胞,與其相連的標記基因表達的GUS可催化X-Gluc產生藍色產物。因此可以通過有無藍色產物來鑒定目的基因是否導入受體細胞。
【解答】
【點評】
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