異丁醇被視為一種高性能生物燃料。某些蛋白如BmoR通?？梢造`敏地響應異丁醇濃度的變化，二者結合后，可以調(diào)控相關基因表達，因此可以用作生物傳感器。科研人員將BmoR基因和熒光蛋白GFP基因?qū)氪竽c桿菌，以篩選異丁醇高產(chǎn)菌株。
（1）將目的基因?qū)氪竽c桿菌，構建的基因表達載體應具備 啟動子、終止子、標記基因、復制原點啟動子、終止子、標記基因、復制原點等結構，以便目的基因能正常表達。在合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)基除了必備的營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足生物對 氧氣、pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)氧氣、pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)（答出2點即可）等環(huán)境因素的需求。
（2）經(jīng)檢測大腸桿菌GFP熒光強度與異丁醇濃度的關系如圖1。推測，通過檢測大腸桿菌GFP熒光強度可篩選異丁醇高產(chǎn)菌株的原理是 BmoR蛋白與異丁醇結合后，促進熒光蛋白GFP基因的表達；GFP熒光強度越強，說明異丁醇的濃度越高BmoR蛋白與異丁醇結合后，促進熒光蛋白GFP基因的表達；GFP熒光強度越強，說明異丁醇的濃度越高。
（3）據(jù)圖，異丁醇濃度超過 2020mM篩選效果不理想。因此該課題組利用蛋白質(zhì)工程技術對BmoR進行改造：從 BmoR的功能BmoR的功能出發(fā)，設計蛋白質(zhì)的空間結構，推測出該有的氨基酸序列，再依據(jù) 中心法則中心法則推測出BmoR基因的核苷酸序列，進而改造BmoR基因。
（4）科研人員對改造后的基因進行PCR擴增，以便進行檢測鑒定。用引物1、4進行PCR擴增，由于一些引物可能結合到錯誤位置而擴增出隨機產(chǎn)物，導致PCR擴增過程有一定的錯誤率。因此可在原有擴增產(chǎn)物中加入引物2、3再進行PCR擴增，以提高正確產(chǎn)物的純度，理由是 正確產(chǎn)物上才有與引物2、3特異性結合的序列，因此引物2和3只能對正確產(chǎn)物進行PCR擴增，而隨機產(chǎn)物無法擴增正確產(chǎn)物上才有與引物2、3特異性結合的序列，因此引物2和3只能對正確產(chǎn)物進行PCR擴增，而隨機產(chǎn)物無法擴增。
【答案】啟動子、終止子、標記基因、復制原點；氧氣、pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)；BmoR蛋白與異丁醇結合后，促進熒光蛋白GFP基因的表達；GFP熒光強度越強，說明異丁醇的濃度越高；20；BmoR的功能；中心法則；正確產(chǎn)物上才有與引物2、3特異性結合的序列，因此引物2和3只能對正確產(chǎn)物進行PCR擴增，而隨機產(chǎn)物無法擴增
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：25引用：3難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6