通過基因工程技術能大量生產人生長激素。圖1所示為人工構建的大腸桿菌質粒pBR322,是由三種質粒經復雜重組過程而構建。其上含氨芐青霉素抗性基因(Ampr )、四環(huán)素抗性基因(Tett)。圖2為相關限制酶的識別序列和酶切位點。請回答下列問題:
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(1)人工構建pBR322質粒需要的酶有 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。
(2)生產生長激素需從人垂體細胞中提取mRNA,逆轉錄得到DNA,以該DNA為 模板模板進行大量復制,獲得 相應的目的基因。
(3)為了構建重組質粒,采用Pst I、EcoR I處理目的基因和質粒,與只用Pst I處理相比,這樣操作的優(yōu)勢是:用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(環(huán)化)、質?!|粒(環(huán)化)等錯誤連接形式(避免產生錯誤連接方式即給分)用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(環(huán)化)、質?!|粒(環(huán)化)等錯誤連接形式(避免產生錯誤連接方式即給分)。將構建的重組質粒導入大腸桿菌后,為了排除普通大腸桿菌(無pBR322質粒)、空質粒大腸桿菌(含pBR322質粒但沒有目的基因)的干擾,進行了進一步檢測。配制甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲培養(yǎng)基含四環(huán)素,乙培養(yǎng)基含四環(huán)素和氨芐青霉素。含目的基因的大腸桿菌在甲培養(yǎng)基上 能能(填“能”或“不能”)生存,在乙培養(yǎng)基上
不能不能(填“能”或“不能”)生存。
(4)導入受體細胞后,常用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術檢測生長激素 在大腸桿菌中是否成功表達。
(5)基因工程的應用十分廣闊,可用轉基因牛制作乳腺生物反應器,從乳汁中提取藥物,則該操作過程中選擇的受體細胞是 牛的受精卵牛的受精卵,原因是 動物受精卵具有全能性(動物不能像植物那樣,利用一個除受精卵以外的獨立的體細胞直接培養(yǎng)成完整的個體)動物受精卵具有全能性(動物不能像植物那樣,利用一個除受精卵以外的獨立的體細胞直接培養(yǎng)成完整的個體)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶、DNA連接酶;模板;用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(環(huán)化)、質?!|粒(環(huán)化)等錯誤連接形式(避免產生錯誤連接方式即給分);能;不能;抗原-抗體雜交;牛的受精卵;動物受精卵具有全能性(動物不能像植物那樣,利用一個除受精卵以外的獨立的體細胞直接培養(yǎng)成完整的個體)
【解答】
【點評】
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