遺傳毒性物質常存在于被化學物質污染的水體，可損傷生物的DNA，嚴重威脅人類健康。研究人員通過基因工程改造大腸桿菌，以期篩選對遺傳毒性物質反應靈敏的工程菌株，用于水質檢測。
（1）大腸桿菌DNA中存在可被遺傳毒性物質激活的毒性響應啟動子序列。將毒性響應啟動子插入圖1所示表達載體的P區(qū)，獲得基因工程改造的大腸桿菌。當改造后的大腸桿菌遇到遺傳毒性物質時，RNA聚合酶RNA聚合酶識別并與啟動子結合，驅動噬菌體裂解基因（SRR） 轉錄轉錄，表達產物可使大腸桿菌裂解。
（2）研究人員選取啟動子sul準備與圖1表達載體連接。圖2顯示了啟動子sul內部存在的酶切位點，右向粗箭頭表示轉錄方向
①據圖1、2信息，克隆啟動子sul時，在其A端和B端應分別添加限制 XhoIXhoI酶和 SapISapI的酶切位點，從而確保啟動子sul可與已被酶切的表達載體正確連接。
②將重組表達載體導入大腸桿菌，置于含有 氨芐青霉素氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基中進行篩選、鑒定及擴大培養(yǎng)，獲得工程菌sul。
（3）研究人員陸續(xù)克隆了其他4種啟動子（rec、imu、qnr、cda），分別連入表達載體，用同樣的方法獲得導入重組載體的工程菌，以篩選最靈敏的檢測菌株。
①將5種工程菌和對照菌在LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，檢測菌體密度，結果如圖3。圖中結果顯示 5種工程菌菌體數量增長趨勢與對照菌一致5種工程菌菌體數量增長趨勢與對照菌一致，說明工程菌在自然生長狀態(tài)下不會產生自裂解現象。
②上述菌株在LB培養(yǎng)基中生長2h時加入遺傳毒性物質，檢測結果如圖4。據圖可知，5種工程菌均啟動了對遺傳毒性物質的響應，應選擇轉入 recrec啟動子的菌株作為最優(yōu)檢測菌株。
（4）對上述工程菌進行工業(yè)化培養(yǎng)，通常采用 液體液體培養(yǎng)基，將工程菌置于可持續(xù)更新營養(yǎng)物質的培養(yǎng)罐中，這種營養(yǎng)物質的添加方式相比于傳統(tǒng)的一次性添加營養(yǎng)物的優(yōu)勢是 補充營養(yǎng)物質，清除代謝廢物補充營養(yǎng)物質，清除代謝廢物。
（5）下列關于該工程菌的敘述，正確的包括 ADAD。
A．該工程菌可能用于檢測土壤、蔬菜中的遺傳毒性物質殘留量
B．該毒性響應啟動子序列廣泛存在于自然界所有物種中
C．其表達產物可裂解大腸桿菌，檢測后的剩余菌液可直接倒掉
D．為長期保存該工程菌，應加入一定濃度的甘油凍存于-20℃
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶；轉錄；XhoI；SapI；氨芐青霉素；5種工程菌菌體數量增長趨勢與對照菌一致；rec；液體；補充營養(yǎng)物質，清除代謝廢物；AD
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：63難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7