2022年12月7日，疫情防控“新十條”發(fā)布，從此，全員核酸檢測成為了歷史。核酸檢測報告單結(jié)果分為檢出和未檢出，即陽性和陰性。RT-PC℉檢測大規(guī)模應(yīng)用于新冠感染篩查中。其檢測流程包括核酸提取、擴(kuò)增、數(shù)據(jù)處理及報告，整個流程需4小時或更長時間，其速度快、操作流程簡單、滿足大規(guī)模的篩查以快速獲得新型冠狀病毒核酸是否為陽性的初步證據(jù)。RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強(qiáng)度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與目的基因互補(bǔ)的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個熒光基團(tuán)R和一個淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴(kuò)增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強(qiáng)弱的監(jiān)測就可實(shí)現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，獲得的核酸產(chǎn)物含有病毒的概率越大。測某基因的C值是指將某目的基因與過量的熒光素混合后放入PCR反應(yīng)體系中，隨PCR產(chǎn)物的積累，將熒光信號達(dá)到設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)次數(shù)稱為Ct值。不同的樣本，數(shù)值不同。請回答下列問題：
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | |
| 1 | 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃ | 10min | 1cycle |
| 2 | 預(yù)變性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
| 3 | 變性 | 95℃ | 10s | 40cycle |
| 退火/延伸/檢測熒光 | 55℃ | 40s | ||
（1）新型冠狀病毒是一種RNA病毒，因此，在核酸提取后，進(jìn)行RT-PCR時需要加入的酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
和 耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）
耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）
。（2）圖甲為某中學(xué)核酸檢測中7支單管樣品的結(jié)果圖片，圖乙是C值圖解。圖甲中陰性參照組為第
7
7
組。原始病毒核酸載量更高的組為第 1
1
組，原因是：熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，核酸產(chǎn)物含有病毒的概率越大，第1組相比其他組Ct值最小
熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，核酸產(chǎn)物含有病毒的概率越大，第1組相比其他組Ct值最小
。（3）臨床上，將癥狀及影像學(xué)結(jié)果高度疑似、核酸多次檢測為“陰性”的現(xiàn)象稱為檢測結(jié)果“假陰性”，導(dǎo)致“假陰性”結(jié)果可能是由于
①②③⑤
①②③⑤
（填序號）。①檢測者處于感染初期
②檢測者感染時間較長
③樣本采集位置不規(guī)范
④樣品稀釋度不足
⑤病毒出現(xiàn)變異
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；免疫學(xué)的應(yīng)用．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；7；1；熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，核酸產(chǎn)物含有病毒的概率越大，第1組相比其他組Ct值最??；①②③⑤
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/12/11 21:30:2組卷：15引用：3難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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