CD47是一種跨膜糖蛋白，肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量明顯高于正常細胞。研究發(fā)現(xiàn)，利用抗體抑制腫瘤細胞表面的CD47蛋白的活性，可促進巨噬細胞吞噬腫瘤細胞。為制備抗CD47的單克隆抗體，科學家按如圖1流程進行相關實驗。請回答下列問題：
（1）圖1EcoRI等均為限制酶，Kanr、Tcr分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。為了構(gòu)建基因表達載體，應該選用 BamHI和XhoIBamHI和XhoI酶切割外源DNA和質(zhì)粒DNA。
（2）為篩選成功導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，利用圖中兩種標記基因，篩選出 能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，利用該菌種獲得大量CD47蛋白。
（3）圖2中①是指從小鼠 脾臟脾臟中獲得免疫后B細胞，經(jīng)過選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行操作②克隆化培養(yǎng)和抗體檢測克隆化培養(yǎng)和抗體檢測才可獲得能分泌抗CD47抗體的雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)該細胞獲得大量單克隆抗體，需要滿足以下條件：無菌無毒環(huán)境，充足的營養(yǎng)和適宜溫度與pH，含有 95%空氣加5%CO295%空氣加5%CO2的氣體環(huán)境。
（4）為驗證抗CD47抗體對巨噬細胞吞噬腫瘤細胞的促進作用，研究人員將巨噬細胞和腫瘤細胞共同培養(yǎng)，加入適量抗CD47抗體，測定巨噬細胞的吞噬能力。要得出該結(jié)論還需要進行的操作是 共同培養(yǎng)巨噬細胞和腫瘤細胞，但不加入抗CD47抗體，測定巨噬細胞的吞噬能力共同培養(yǎng)巨噬細胞和腫瘤細胞，但不加入抗CD47抗體，測定巨噬細胞的吞噬能力。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHI和XhoI；能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長；脾臟；克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；95%空氣加5%CO2；共同培養(yǎng)巨噬細胞和腫瘤細胞，但不加入抗CD47抗體，測定巨噬細胞的吞噬能力
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：47引用：6難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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