四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強和生長速度快等優(yōu)點，如果能將其進行品種改良，提高含油量，有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁?，獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻，利用地熱廢水培養(yǎng)，不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地熱廢水。操作過程如圖，請回答下列問題：
注：LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。
（1）將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導入大腸桿菌前，通常先用Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（2）為了便于篩選含pMD19-DGAT1重組質(zhì)粒的大腸桿菌，該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加 卡那霉素和X-gal卡那霉素和X-gal物質(zhì)。在培養(yǎng)基中挑取 白色白色顏色的大腸桿菌菌落可提取該 質(zhì)粒并獲取目的基因。
（3）由如圖推測，用 EcoRⅠEcoRⅠ和 SmaⅠSmaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得DGATI基因，并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達載體，用這兩種酶切割的目的是 保證其準確插入質(zhì)粒（定向連接）并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）保證其準確插入質(zhì)粒（定向連接）并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）。
（4）啟動子往往具有物種特異性，在載體pBI121質(zhì)粒中插入紫蘇DGAT1基因，其上游啟動子應(yīng)選擇 BB（填字母）。
A．紫蘇DGAT1基因啟動子 B．四尾柵藻啟動子 C．大腸桿菌啟動子
（5）為了判斷DGAT1基因是否導入四尾柵藻細胞，可利用 聚合酶鏈式反應(yīng)聚合酶鏈式反應(yīng)（中文全稱）等技術(shù)進行檢測。
（6）為檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；卡那霉素和X-gal；白色；EcoRⅠ；SmaⅠ；保證其準確插入質(zhì)粒（定向連接）并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）；B；聚合酶鏈式反應(yīng)；應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/12/18 13:30:2組卷：28引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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