人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，人乳頭瘤病毒疫苗可以預(yù)防由HPV引起的多種宮頸癌，是世界上第一個預(yù)防癌癥的疫苗。圖a是HPV疫苗制備所需的L1基因片段，圖b是某種質(zhì)粒載體。

回答下列問題：
（1）為構(gòu)建重組HPV疫苗，科研人員將L1基因插入質(zhì)粒中，最好選擇限制酶

BamHI、HindⅢ

BamHI、HindⅢ

進行共同切割，原因是

不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點不唯一，導致結(jié)果不可控

不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點不唯一，導致結(jié)果不可控

（答出2點即可）。
（2）圖中啟動子為RNA聚合酶結(jié)合位點，該處序列應(yīng)根據(jù)

大腸桿菌

大腸桿菌

（填“人宮頸細胞”或“乳頭瘤病毒”或“大腸桿菌”）的RNA聚合酶識別序列來設(shè)計。
（3）若將工具酶處理目的基因和質(zhì)粒載體得到的混合物經(jīng)過連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的含有質(zhì)粒載體，有的含帶有目的基因的重組質(zhì)粒。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述三種大腸桿菌中，能夠正常生長的有

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌

，這些大腸桿菌能正常生長的原因是

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長

﹔若將上述篩選出來的大腸桿菌，培養(yǎng)在含有卡那霉素的固體培養(yǎng)基上，其生長情況可能是

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌能正常生長，而含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能生長

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌能正常生長，而含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能生長

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（4）導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌表達產(chǎn)物衣殼蛋白L1經(jīng)純化，可被免疫系統(tǒng)識別，引起免疫反應(yīng)。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效。從疫苗的組成成分分析，其主要原因是

衣殼蛋白L1無核酸成分，無繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

衣殼蛋白L1無核酸成分，無繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

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