為滿足對SARS-CoV-2(新冠病毒)和COVID-19(新冠肺炎)研究等方面的需要,我國科學家制備了多種新冠肺炎模型小鼠。
(1)新冠病毒與人體細胞表面的血管緊張素轉化酶2(hACE2)結合后,進入細胞引起新冠肺炎。由于鼠源ACE2(mACE2)與hACE2空間結構不同,使新冠病毒不易感染小鼠。構成mACE2與hACE2的氨基酸的 種類、數(shù)目、排序種類、數(shù)目、排序不同,都可能導致其空間結構 不同。
(2)利用CRISPR/Cas9技術將hACE2基因插入小鼠受精卵mACE2基因中(圖1),獲得表達hACE2的模型小鼠。
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①IRES序列可在mRNA內(nèi)部介導核糖體與mRNA結合。為使hACE2基因和熒光蛋白基因(報告基因)在小鼠mACE2基因啟動子驅動下共轉錄,且合成兩種獨立的蛋白,請選擇外源序列應包含的組件并從上游到下游進行排序 CED(B)CED(B)。
A.啟動子
B.終止子
C.hACE2的cDNA
D.熒光蛋白基因的cDNA
E.IRES序列
②獲得F0代小鼠后,還需要通過 核酸分子雜交/PCR核酸分子雜交/PCR檢測目的基因是否導入。
③模型小鼠機體中熒光的分布和強度可反映hACE2基因 在機體中表達的部位和強度在機體中表達的部位和強度。
(3)為尋找有效的抗原來研發(fā)新冠疫苗,用新冠病毒蛋白(S、N、M、E)分別免疫小鼠,一段時間后提取免疫血清并注射給模型小鼠,而后用等量的新冠病毒感染模型小鼠,檢測肺部組織中病毒含量,結果如圖2。
①應選擇 SS蛋白來制備疫苗,依據(jù)是 感染后1天和3天,只有注射S免疫血清組病毒含量明顯低于對照組感染后1天和3天,只有注射S免疫血清組病毒含量明顯低于對照組。
②從感染后1天到3天,注射S免疫血清組小鼠病毒含量下降的原因可能有 模型小鼠的免疫系統(tǒng)清除一部分病毒,S免疫血清中抗體與病毒S抗原結合抑制病毒侵染與增殖模型小鼠的免疫系統(tǒng)清除一部分病毒,S免疫血清中抗體與病毒S抗原結合抑制病毒侵染與增殖。
【考點】免疫學的應用.
【答案】種類、數(shù)目、排序;CED(B);核酸分子雜交/PCR;在機體中表達的部位和強度;S;感染后1天和3天,只有注射S免疫血清組病毒含量明顯低于對照組;模型小鼠的免疫系統(tǒng)清除一部分病毒,S免疫血清中抗體與病毒S抗原結合抑制病毒侵染與增殖
【解答】
【點評】
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