神經纖毛蛋白-1（NRP-1）能在腫瘤細胞內表達，是血管內皮生長因子的新型受體，通過參與多種信號轉導來促進腫瘤血管的生成。研究人員從腫瘤細胞中擴增出NRP-1基因并將其導入大腸桿菌體內進行發(fā)酵培養(yǎng)，分離提純相應NRP-1，并將其免疫小鼠，為靶向治療乳腺癌（MCF7）提供抗NRP-1的單克隆抗體（NRP-1MAb）。
（1）利用PCR技術可以從腫瘤細胞的基因組中分離擴增得到完整的NRP-1基因，其原因是使用與NRP-1基因兩端特異性結合與NRP-1基因兩端特異性結合的引物可以從模板DNA中擴增出該基因。該技術可用于基因工程四個基本步驟中的獲取目的基因和目的基因的檢測與鑒定獲取目的基因和目的基因的檢測與鑒定步驟。
（2）NRP-1基因表達載體的構建如圖1所示。表達載體上除了標注的DNA片段外，在NRP-1基因上游還必須擁有的DNA片段（箭頭所示）是啟動子啟動子，其作用是RNA聚合酶識別和結合的位點，啟動轉錄RNA聚合酶識別和結合的位點，啟動轉錄。
（3）研究人員將分離提純的NRP-1免疫小鼠后，取其脾臟中B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，在該培養(yǎng)基上不能存活的是未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞。選取檢測抗體陽性的雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)時需要的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO295%的空氣和5%的CO2。
（4）研究發(fā)現，NRP-1在MCF7細胞中高表達。將MCF7細胞制成單細胞懸液，等量注入4組裸鼠右前腋下，接種后3天開始給藥NRP-1MAb（低劑量lmg/kg；中劑量5mg/kg；高劑量10mg/kg），共給藥7次。每隔5天測算一次腫瘤的體積，如圖2所示。分析圖2可得出的結論是NRP-1MAb能有效地降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著NRP-1MAb能有效地降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著。
（5）由題中信息推測NRP-1Mab抑制腫瘤的作用機理是：NRP-1Mab與NRP-1特異性結合，阻斷了血管內皮生長因子與NRP-1的結合血管內皮生長因子與NRP-1的結合，抑制了腫瘤血管生成，進而降低了腫瘤的體積。
【答案】與NRP-1基因兩端特異性結合；獲取目的基因和目的基因的檢測與鑒定；啟動子；RNA聚合酶識別和結合的位點，啟動轉錄；未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞；95%的空氣和5%的CO2；NRP-1MAb能有效地降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著；血管內皮生長因子與NRP-1的結合
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/26 8:0:9組卷：14引用：4難度：0.7
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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