蜘蛛絲（絲蛋白）有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度?？芍瞥煞缽棻承?、人造韌帶等。蜘蛛通過在腹部的腺體生成蜘蛛絲，并使用一種名為“噴絲頭”的器官將蛛絲排出體外。由于蜘蛛會(huì)互相攻擊，吃掉同類，因此無(wú)法像蠶絲一樣通過養(yǎng)殖大量生產(chǎn)。美國(guó)科學(xué)家蘭迪?萊維斯把一些蜘蛛DNA轉(zhuǎn)置到山羊的DNA中，使其產(chǎn)出的羊奶經(jīng)過提煉、干燥后變成與蜘蛛絲質(zhì)地一模一樣的絲綢。如圖是創(chuàng)造“蜘蛛羊”的過程，回答下列問題：

（1）從

蜘蛛腹部腺體

蜘蛛腹部腺體

細(xì)胞中提取mRNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，根據(jù)

蛛絲蛋白基因兩端的已知脫氧核苷酸序列

蛛絲蛋白基因兩端的已知脫氧核苷酸序列

設(shè)計(jì)引物，獲取和擴(kuò)增目的基因，通常采用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

的方法來(lái)鑒定其擴(kuò)增產(chǎn)物。
（2）甲過程需用到的工具有

限制酶、DNA連接酶、載體

限制酶、DNA連接酶、載體

（填工具名稱）。對(duì)X中的啟動(dòng)子的要求是

能使蜘蛛絲蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)

能使蜘蛛絲蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)

。
（3）科學(xué)家將蜘蛛牽絲蛋白基因整合到細(xì)毛羊胎兒成纖維細(xì)胞中，并用此細(xì)胞作為核供體，結(jié)合核移植技術(shù)，成功獲得了能合成蛛絲蛋白的轉(zhuǎn)基因細(xì)毛羊。
①對(duì)成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外傳代培養(yǎng)時(shí)，需用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再用

離心法

離心法

法收集細(xì)胞，之后再繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。
②用細(xì)毛羊卵母細(xì)胞作為核移植的受體，在核移植之前必須先對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行的操作是培養(yǎng)至

MⅡ

MⅡ

時(shí)期，通過顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞“核”，該“核”實(shí)質(zhì)為

紡錘體-染色體復(fù)合物

紡錘體-染色體復(fù)合物

。
③采用羊胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆的優(yōu)勢(shì)在于可以獲得

可以獲得大量遺傳物質(zhì)相同的后代

可以獲得大量遺傳物質(zhì)相同的后代

。為了提高已有重組胚胎的利用率，可采用

胚胎分割

胚胎分割

技術(shù)。