人t-PA蛋白能高效溶解血纖維蛋白凝聚的血栓。用傳統(tǒng)基因工程生產(chǎn)的t-PA給心梗患者大劑量注射卻會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血,原因在于其與血纖維蛋白結(jié)合的特異性低,但若將其第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,就能顯著降低出血副作用。據(jù)此,科學(xué)家對(duì)人t-PA基因進(jìn)行序列改造,再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該突變基因,制造出了高性能的t-PA突變蛋白。
(1)人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA.絲氨酸的密碼子為UCU,突變基因中對(duì)應(yīng)該氨基酸密碼子的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為AGAAGA。
(2)上述獲得突變目的基因的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的基因脫氧核苷酸序列從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的基因脫氧核苷酸序列。
(3)如圖所示t-PA突變基因、質(zhì)粒,用Xmal、Bg/IIXmal、Bg/II限制酶切開(kāi)該質(zhì)粒較好。
(4)將相應(yīng)的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中,含t-PA突變基因的細(xì)胞應(yīng)具有的性狀是新霉素抗性且呈白色新霉素抗性且呈白色。
(5)上述生物工程技術(shù)是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ)的,首先通過(guò)基因修飾或基因合成基因修飾或基因合成,再進(jìn)行對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造新的蛋白質(zhì)對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造新的蛋白質(zhì),以滿足醫(yī)療需求的。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】AGA;從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的基因脫氧核苷酸序列;Xmal、Bg/II;新霉素抗性且呈白色;蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系;基因修飾或基因合成;對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造新的蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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