當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年重慶市高三（上）第四次質(zhì)檢生物試卷> 試題詳情

DNA分子雜交時，常需要大量的單鏈DNA探針。不對稱PCR是一種常見的單鏈DNA探針制備方法，其原理是反應(yīng)體系中加入一對數(shù)量不相等的引物。在PCR反應(yīng)的早期10-15個循環(huán)中，擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA，當(dāng)后期數(shù)量較少的限制性引物耗盡后，數(shù)量較多的非限制性引物將引導(dǎo)合成大量目標(biāo)DNA單鏈。

（1）若A鏈為所需的DNA分子探針，則非限制性引物應(yīng)選用引物
Ⅳ
Ⅳ
；PCR反應(yīng)緩沖體系中一般要添加
Mg²⁺
Mg²⁺
以激活耐高溫的DNA聚合酶。
（2）進(jìn)行最初10-15個循環(huán)的目的是
增加模板DNA的量
增加模板DNA的量
。如果體系中原模板DNA的數(shù)量為a,最初10次循環(huán)產(chǎn)物為雙鏈，后15次循環(huán)產(chǎn)物為單鏈，則最終獲得的單鏈探針數(shù)為
15×2¹⁰?a
15×2¹⁰?a
。因?yàn)镈NA單鏈與雙鏈的分子量不同，可通過
（瓊脂糖凝膠）電泳
（瓊脂糖凝膠）電泳
將單鏈探針DNA分離出米。
（3）為精確控制產(chǎn)物生成量，科學(xué)家嘗試設(shè)計了較長的非限制性引物與較短的限制性引物，在進(jìn)行一定的循環(huán)次數(shù)后，適當(dāng)提高復(fù)性溫度以避免殘留限制性引物與模板結(jié)合。高復(fù)性溫度條件下限制性引物不能結(jié)合模板鏈的原因是
引物越短，復(fù)性時可與模板鏈形成的氫鍵數(shù)越少，越容易被高溫破壞
引物越短，復(fù)性時可與模板鏈形成的氫鍵數(shù)越少，越容易被高溫破壞
。

【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．

【答案】Ⅳ；Mg²⁺；增加模板DNA的量；15×2¹⁰?a；（瓊脂糖凝膠）電泳；引物越短，復(fù)性時可與模板鏈形成的氫鍵數(shù)越少，越容易被高溫破壞

【解答】

【點(diǎn)評】

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發(fā)布：2024/9/9 0:0:8組卷：7引用：2難度：0.6

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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO₂的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于

（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用

將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的

技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是

。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入

個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為

?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是

。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是

。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代
發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6
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