2017年CAR-T療法獲批可用于癌癥治療。其核心是將具有腫瘤識(shí)別功能的CAR基因整合到人體T淋巴細(xì)胞,形成能準(zhǔn)確定位并殺死癌細(xì)胞的CAR-T細(xì)胞,請(qǐng)回答下列問題:
(1)已知CAR基因的全部序列,科研人員通過人工合成人工合成法和PCR技術(shù)可獲得大量該基因片段。在PCR反應(yīng)體系中除模板外還需加入引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸。
(2)治療基本過程是:分離患者T細(xì)胞并構(gòu)建CAR-慢病毒運(yùn)載體→體外基因轉(zhuǎn)移形成CAR-T細(xì)胞→篩選、培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞→輸入患者體內(nèi),該療法屬于體外基因體外基因治療,該運(yùn)載體進(jìn)入人體細(xì)胞的方式通常是胞吞胞吞。該方法采用的是自身T細(xì)胞,而不用異體T細(xì)胞,其原因是避免發(fā)生排斥反應(yīng)避免發(fā)生排斥反應(yīng)。
(3)為檢查CAR基因能否在T細(xì)胞中翻譯成蛋白質(zhì),可采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法檢測(cè),CAR-T細(xì)胞培養(yǎng)基中通常需加入血清、血漿血清、血漿等天然成分,傳代培養(yǎng)時(shí),貼滿瓶壁的細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理后再進(jìn)行分瓶培養(yǎng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】人工合成;引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷酸;體外基因;胞吞;避免發(fā)生排斥反應(yīng);抗原-抗體雜交;血清、血漿;胰蛋白酶或膠原蛋白酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:11引用:1難度:0.7
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